流式细胞DNA分析是可以研究间期细胞，并不受细胞增殖状态的影响，对检测胸腔积液中的恶性细胞的有重要意义的一种检查方法。流式细胞仪的检测范围：(1) 流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。(2) 流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。
名称
流式细胞DNA分析
所属分类
特殊检查
身体处于动态平衡中，没有疾病。
流式细胞仪的临床应用： (1) 流式细胞术在肿瘤学中的应用：流式细胞术可以检测肿瘤细胞增殖周期、检测肿瘤细胞表面标记、癌基因表达产物、进行多药耐药性分析、检测凋亡 (2) 流式细胞术在血液学中的应用：检测白血病和淋巴瘤细胞、活化血小板、造血干细胞(CD34 )计数、白血病与淋巴瘤的免疫分型、网织红细胞计数、细胞移植的交叉配型和免疫状态监测 (3) 流式细胞术在免疫学中的应用：可以进行淋巴细胞及其亚群分析、淋巴细胞免疫分型、检测细胞因子。异常结果：有资料表示对71例胸腔积液做流式细胞DNA分析，结果显示，对恶性胸腔积液诊断的敏感性为52%，特异性达100%。若与常规检查联合应用，则可使诊断的敏感性达到94%。癌性胸水细胞的DNA分析可见异倍体和S期、G2/M期细胞比例增高。 需要检查的人群：疑似有癌性胸水等相关疾病者
流式细胞仪并非是完全自动化的仪器，准确的实验结果还需要准确的人工技术配合，所以标本制备需要规范，仪器本身亦需要质量控制。 (1) 流式细胞术免疫学检测的影响因素和质量控制 流式细胞术在免疫学中有着广泛的应用，其免疫荧光染色的标本制备非常重要，常常由于标本制备过程中出现人为非特异性荧光干扰(尤其在间接免疫荧光染色中)或细胞浓度低等影响检测结果。解决这些影响因素的方法如下： ① 确保标本上机检测前的浓度为1X106细胞/ml，细胞浓度过低直接影响检测结果。 ② 使用蛋白封闭剂，封闭非特异结合位点，尤其在间接免疫荧光标记时必不可少。常用的蛋白封闭剂为0.5%牛血清白蛋白和1%胎牛血清。 ③ 荧光抗体染色后充分洗涤，注意混匀和离心速度，减少重叠细胞和细胞碎片。 ④ 设置对照样品，采用与抗体来源同型匹配的无关对照和荧光抗体的本底对照。 ⑤ 判定结果时，应注意减去本底荧光，为使免疫荧光的定量分析更精确，应用计算机程序软件，用拟合曲线方法从实验组的曲线峰值中减去对照组的曲线峰值，可以得到更准确的免疫荧光定量结果。 ⑥ 注意染色后避光，保证细胞免疫荧光的稳定。 (2) DNA倍体分析的质量控制仍没有统一的标准，各文献报道的实验结果差异较大，1993年10月美国癌症研究组织制定了FCMDNA 测定的统一标准，我们根据这些标准并结合国内有经验的专家多年的实践，对FCM的DNA分析技术的质控和注意事项进行说明。 ① 手术切除的新鲜标本或活检针吸标本取材时，要避免出血坏死组织。 ② 标本采集后要及时固定或深低温保存，以免组织发生自溶，DNA 降解，而造成测试结果的误差。 ③ 固定剂要采用对组织细胞穿透性强的浓度，70%的乙醇固定效果较好。 ④ 单细胞悬液制备过程中，注意将待测细胞成分分离出来，减少其他成分的干扰，并注意不要损伤该群细胞。 ⑤ 细胞样品的采集要保证足够的细胞浓度，即1X106细胞/ml，杂质、碎片、团块和重叠细胞应
本文链接： http://zila.immuno-online.com/view-492361.html
